【??參數信息】
英文名稱：OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
中文名稱：OverExpress C43大腸桿菌化學感受態細胞
規格：10×100μl，50×100μl
運輸：低溫運輸
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
生產廠商：西安強化生物科技
【簡單概述】
菌株描述
OverExpress C41(DE3)、C41(DE3) pLysS、C43(DE3)和C43(DE3) pLysS都是大腸桿菌菌株，有效表達不同物種有機生物體包括細菌、酵母菌、植物、病毒和哺乳動物來源的毒性蛋白。
OverExpress菌株含賦予毒性蛋白抗性的遺傳突變。C41(DE3)菌株來源于BL21(DE3)，此菌株含一個突變，能降低T7 RNA聚合酶（T7 RNAP）的水平，從而預防許多重組毒性蛋白過表達引起的細胞死亡。
C43(DE3)菌株來源于C41(DE3)，通過篩選對另一個不同毒性蛋白的抗性菌株而獲得。C43(DE3)與C41(DE3)菌株相比，至少攜帶另一個不同突變，使其獲得廣泛的毒性蛋白耐受能力。
正如BL21(DE3)菌株，OverExpress C41(DE3)、C41(DE3) pLysS、C43(DE3)和C43(DE3) pLysS都含DE3區，所有菌株染色體上整合λ噬菌體DE3溶原體，適用于靶基因克隆進入T7啟動子表達載體比如pET系列的蛋白生產。
OverExpress C41(DE3) pLysS和C43(DE3) pLysS菌株攜帶pLysS質粒，具有抗性，能夠表達少量T7。
T7溶菌mei能作用于大腸桿菌細胞壁上的肽聚糖溶解大腸桿菌，降低目的基因的背景表達水平，但不會干擾IPTG誘導的表達，從而能夠穩定重組表達的蛋白，特別是毒性蛋白。
需加入菌株培養基內以維持pLysS質粒。
基因型：F–ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)
OverExpress C43大腸桿菌化學感受態細胞經特殊工藝制作所得的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。
經pUC19質粒檢測轉化效率可達1×108 cfu/μg DNA。
且在-80℃能穩定保存幾個月轉化效率不發生改變。
【使用方法】
（1）準備工作：從-80℃冰箱取出感受態細胞，迅速置于冰浴中融化（約5分鐘）。操作時需穿實驗服、戴手套。
（2）加入DNA：待菌塊融化后，加入目的DNA（質粒或連接產物），輕彈管底混勻（避免用槍吸打）。注意：DNA體積不超過感受態細胞體積的1/10。
（3）冰浴孵育：冰浴靜置25分鐘。
（4）熱激處理：42℃水浴熱激45秒或30秒，立即轉移至冰浴靜置2分鐘。此過程勿搖動離心管。
（5）復蘇培養：加入預熱至室溫的SOC或LB培養基，37℃搖床培養45-60分鐘。
（6）涂板篩選：取適量菌液涂布于含34μg/ml氯霉su（防質粒丟失）和對應抗生素的瓊脂板。高濃度質粒需減少涂板菌量。
（7）誘導表達：若需蛋白表達，挑取單克隆至含抗生素的LB培養基，培養至OD600=0.6-0.8后，用0.1~2mM IPTG誘導。需優化誘導時間、溫度及IPTG濃度。
【相關試劑】
MPP+ iodide
Tide Quencher 1胺
Tide Quencher 3胺
SDS Lysis Buffer SDS裂解液
RIPA Lysis Buffer (Strong)RIPA
RIPA Lysis Buffer(Medium)RIPA
RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液(弱)
Rosetta (DE3)Competent Cell大腸桿菌感受態細胞
Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell
TB1 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學感受態細胞
Tuner(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌化學感受態細胞
Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態細胞
Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態細胞
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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。
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