【參數信息】
英文名稱:Fluorescein ConA;ConA-FITC;Fluorescein- Concanavalin A
中文名稱:FITC標記刀豆球蛋白A ;FITC-刀豆蛋白A;熒光素標記刀豆球蛋白A
糖特異性: 甘露糖
激發波長:495 nm
發射波長:515 nm
熒光:綠
應用:免疫熒光、糖生物學
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】(熒光素標記刀豆球蛋白A)
Con A recognizes alpha-linked mannose as a "core oligosaccharide" present in many serum and membrane glycoproteins.
Fluorescein labeled Con A has the appropriate amount of fluorescent dye binding to provide the best staining properties for this lectin.
This conjugated substance basically does not contain unconjugated fluorescent dyes.
Con A 將 α 連接甘露糖識別為存在于許多血清和膜糖蛋白中的“核心低聚糖”。
熒光素標記的 Con A 具有適量的熒光染料結合,可為該凝集素提供的染色性能。
這種共軛物質基本上不含未共軛熒光染料。
Fluorescein ConA(異硫氰酸熒光素標記的刀豆蛋白A)是一種重要的生物化學探針,由刀豆蛋白A(Concanavalin A, ConA)與熒光素(如FITC)通過共價結合形成。
其技術背景源于糖生物學和細胞表面標記研究的進展,旨在實現對細胞表面糖基化結構的特異性熒光標記與可視化監測。
【Fluorescein ConA作為親和探針,是如何通過ConA-瓊脂糖柱分離富集含甘露糖/葡萄糖的糖蛋的?分析一下原理和步驟】
(一)原理
ConA的糖結合特異性:
ConA是一種植物凝集素,可特異性識別并結合α-D-甘露糖、α-D-葡萄糖及其衍生物。
每個ConA四聚體含有4個糖結合位點,需依賴Ca2?和Mn2?維持結合活性。
熒光標記的探針功能:
Fluorescein ConA中的熒光素標記(如FITC)不干擾糖結合活性,但賦予探針熒光特性,便于后續檢測(如熒光顯微鏡或流式細胞術)。
在分離過程中,熒光標記主要用于示蹤或驗證結合效率,而非直接參與分離。
親和層析分離機制:
ConA通過共價鍵固定在瓊脂糖微球上,形成ConA-瓊脂糖柱。當樣品流過層析柱時,含甘露糖/葡萄糖的糖蛋白與固定化ConA特異性結合,其他非靶標蛋白被洗脫。隨后通過競爭性洗脫(如添加游離甘露糖)釋放目標糖蛋白。
(二)步驟
1. 柱制備與平衡
將ConA-瓊脂糖凝膠填充至層析柱,用結合緩沖液平衡,以激活ConA的糖結合位點。
2. 樣品加載與結合
將樣品(如細胞裂解液或血清)加載至柱中,含甘露糖/葡萄糖的糖蛋白與ConA特異性結合,非結合成分通過洗滌緩沖液(如平衡緩沖液)去除。
3. 洗脫與收集
使用競爭性洗脫緩沖液(如含200 mM α-甲基甘露糖苷或葡萄糖苷的緩沖液)解離結合糖蛋白。游離糖與ConA競爭結合位點,釋放目標糖蛋白。
4. 檢測與驗證
收集的洗脫液可通過熒光檢測(若使用Fluorescein ConA作為探針示蹤)或Western blot、質譜進一步分析糖蛋白組成。
【相關試劑】
AF405 PEG4 DBCO
AF405 C5馬來酰亞胺
剛果紅 CAS 573-58-0
AF488-刀豆蛋白A(ConA)探針
Annexin V-iFluor 488標記
iFluor 790 acid iFluor 790酸
iFluor 830 acid iFluor 830 酸
mFluor UV 540琥珀酰亞胺酯
Buccutite PE-Cy7抗體標記試劑盒
PerCP-iFluor 700 PerCP-iFluor 700 串聯染料
ATTO 488 acid ATTO 488酸 1443553-08-9
APC-XFD700 Tandem APC-XFD 700 串聯染料
APC-iFluor 720 Tandem APC-iFluor 720 串聯染料
APC-iFluor 710 Tandem APC-iFluor 710 串聯染料
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。












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