【??參數信息】
英文名稱：OrigamiB(DE3) Chemically Competent Cell
中文名稱：OrigamiB(DE3) 大腸桿菌化學感受態細胞
規格：10×100μl，50×100μl
運輸：低溫運輸。
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
生產廠商：西安強化生物科技
【簡單概述】
OrigamiB菌株與原始菌Origami一樣，包含突變的硫氧還蛋白還原酶和gor，表達主要還原途徑的兩個關鍵酶，有利于形成正確折疊的含二硫鍵的蛋白，增強蛋白的可溶性。
該菌株包含BL21的lon和ompT缺失，能提高蛋白穩定性。
DE3命名表明該菌株染色體上整合λ噬菌體DE3溶原體。
這種菌株適用于目的基因克隆在pET載體上的蛋白生產，由IPTG誘導表達。
具有KanR和四環素抗性，因此不適合與僅能用KanR或四環素篩選的質粒聯用。
基因型：F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522:: Tn10 trxB (KanR, TetR)
OrigamiB(DE3) 大腸桿菌化學感受態細胞是經特殊工藝制作所得的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。
經pUC19質粒檢測轉化效率可達108 cfu/μg DNA。
且在-80℃能穩定保存幾個月轉化效率不發生改變。
【實驗步驟】
（所有操作需在無菌條件下進行）：
（1）融化細胞：從-80℃取出感受態細胞（建議用量50-100μL），置于冰浴中融化約5分鐘。
（2）加入DNA：加入目的DNA，輕彈管底混勻，冰浴靜置25分鐘。
（3）熱激：42℃水浴熱激45秒。
（4）冰?。貉杆俎D移回冰浴，靜置2分鐘（避免搖動）。
（5）復蘇：加入700μL SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后37℃搖床復蘇45分鐘。
（6）涂布培養：涂布于含相應抗生素的LB固體平板上，37℃倒置培養12-16小時。
注意事項：
細胞保存于-80℃，避免反復凍融。
菌株具有KanR和四環素抗性，不能用于具此抗性質粒的表達。
誘導蛋白表達時，IPTG濃度可選0.1~2mM，需優化時間、溫度和濃度。
操作時穿實驗服并戴手套，確保無菌。
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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。
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