【??參數(shù)信息】
英文名稱：Fluorescein di(β-D-galactopyranoside)
中文名稱：熒光素二(β-D-吡喃半乳糖苷)
CAS NO：17817-20-8
分子式：C32H32O15
分子量：656.59
狀態(tài)：淺黃色固體
Emission (Em) ：520
Excitation (Ex)：488
摩爾吸光系數(shù)：80000 cm-1M-1(0.1N NaOH)
光量子產(chǎn)率：0.95(0.1N NaOH)
純度：≥95%
儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
FDG（Fluorescein di(β-D-galactopyranoside)）是一種人工合成的熒光底物，其結(jié)構(gòu)由熒光素核心通過糖苷鍵連接兩個(gè)β-D-吡喃半乳糖基團(tuán)組成。
被β-半乳糖苷酶水解后會(huì)釋放出熒光素，激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為490/514nm，產(chǎn)生的熒光與酶活力成正比。
FDG主要用于以β-半乳糖苷酶（LacZ）作為報(bào)告基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)水平的檢測(cè)。
FDG能進(jìn)入活細(xì)胞，用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和革蘭氏陰性菌中通過流式細(xì)胞術(shù)來(lái)檢測(cè)β-半乳糖苷酶活性。
FDG也能用于顯色法的方式來(lái)檢測(cè)β-半乳糖苷酶活性，因?yàn)槊复x產(chǎn)物-熒光素呈現(xiàn)大的摩爾吸光系數(shù)，但是，基于熒光素的測(cè)定法比基于吸光度的測(cè)定法靈敏度高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。
【使用方法】
體外研究
衰老相關(guān) β-半乳糖苷酶 (SA-βG) 活性測(cè)定。
將細(xì)胞 (每孔 5×103 個(gè)細(xì)胞) 培養(yǎng)于 96 孔板中。
用 PBS 清洗三次。
在含有 2% 甲醛和 0.2% 戊二醛中固定 5 分鐘。
用 PBS 清洗三次。
將 100 μL 反應(yīng)緩沖液 (即不含 X-Gal 的染色液) 加入每孔中。
每孔加入 10 μL 2 mM FDG，在 37°C 避光條件下孵育 24 小時(shí)，無(wú)需 CO2 供應(yīng)。
使用熒光計(jì) (Ex/Em = 485/535 nm) 測(cè)量熒光素?zé)晒狻?/span>
【相關(guān)試劑】
iFluor594 Phalloidin
iFluor 555 Phalloidin
Prostaglandin A3
Prostaglandin E3
Prostaglandin A2
碘化乙啶(HI),Ethidium Iodide
Alexa Fluor 405-Streptavidin
Alexa Fluor 647-Streptavidin
Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)
BAPTA，Tetrasodium Salt鈣螯合劑
EGTA AM，CalciumChelator鈣螯合劑
Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit
Aminoethoxyvinylglycine (AVG) Hydrochloride
Indo-1,AM,Cell Permeant 鈣離子熒光探針 112926-02-0
Fluo-8 Potassium Salt, Cell lmpermeant 鈣離子熒光探針
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