碘化乙啶(HI)，Ethidium Iodide

試劑名稱：碘化乙啶(HI)，Ethidium Iodide

儲(chǔ)存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋運(yùn)輸。

產(chǎn)地：西安強(qiáng)化生物

CAS：211566-66-4

分子式：C25H28IN3

分子量：497.41

一、描述與基本特性：

碘化乙啶(HI)，Ethidium Iodide是一種菲啶鎓類核酸染色劑，屬于中等親脂性熒光染料。

與DNA結(jié)合后，激發(fā)波長(zhǎng)（Ex）518 nm，發(fā)射波長(zhǎng)（Em）600 nm，發(fā)出橙紅色熒光。

熒光強(qiáng)度與DNA結(jié)合量成正比，適用于定量分析。

應(yīng)用領(lǐng)域

（一）核酸染色與細(xì)胞分析

作用機(jī)制：嵌入DNA雙螺旋堿基對(duì)，結(jié)合后熒光強(qiáng)度增強(qiáng)（游離態(tài)熒光微弱）。

細(xì)胞通透性：可穿透哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜，染色細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核，線粒體與核仁也可能著色。

（二）微生物學(xué)檢測(cè)

革蘭氏陽(yáng)性菌選擇性染色：

在含革蘭氏陰性菌的環(huán)境中，特異性染色幾乎全部革蘭氏陽(yáng)性菌。

需經(jīng)EDTA預(yù)處理以滲透細(xì)菌細(xì)胞壁，結(jié)合DNA后顯熒光。

應(yīng)用示例：評(píng)估巨噬細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬能力 。

（三）其他生物分析

檢測(cè)核酸結(jié)合蛋白、酵母、霉菌；

分析多核苷酸結(jié)構(gòu)、核酸擴(kuò)增；

測(cè)量膜電位/跨膜電位。

二、常見(jiàn)問(wèn)題

能否用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞核染色？

→ 不推薦?？赡芪廴酒渌?xì)胞器（如線粒體），建議選用專用核染料（如DAPI）。

染色失敗的可能原因？

→ ① 細(xì)菌未充分透化（革蘭氏陰性菌需EDTA預(yù)處理）；② 光照導(dǎo)致淬滅；③ DMSO濃度過(guò)高影響活性。

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