【參數信息】
英文名稱：TOTO 1 Green Fluorescent Dye
中文名稱：TOTO 1綠色熒光染料
CAS NO：143413-84-7
分子式：C49H58I4N6S2
分子量：1302.78
外觀：溶液
Ex/Em：~514/531nm
消光系數：117000 cm -1 M -1
光量子產率：0.34
儲存條件：-20℃避光干燥
生產廠商：西安強化生物科技
【簡單概述】
TOTO 1綠色熒光染料是一種細胞非通透性、高親和力的核酸熒光染料，屬于噻唑橙同源二聚體（Thiazole Orange Homodimer, TOhD）。
其主要功能是選擇性標記死細胞或固定細胞的核酸（DNA/RNA），產生明亮的綠色熒光信號。
化學本質：對稱性氰基二聚體結構（bis-intercalator），，含四個正電荷，增強與核酸的親和力 。
熒光機制
選擇性結合：游離狀態下無熒光，嵌入核酸（DNA/RNA）后熒光強度增強100-1000倍。
電荷效應：4個正電荷大幅提升與帶負電核酸的親和力，靈敏度遠超單菁染料（如碘化乙錠）。
【染色步驟優化】
工作液配制：
儲存液（5 mM in DMSO）需室溫解凍，低速離心后，用HHBS緩沖液或生理緩沖液稀釋至1–10 μM工作濃度。
實驗必做濃度梯度測試：避免高濃度（>10 μM）導致非特異性染色（如細胞質背景）。
染色流程：
1. 吸除細胞培養基；
2. 加入TOTO 1工作液，覆蓋細胞（懸浮/貼壁均適用）；
3. 避光孵育15–60分鐘（時間依細胞類型優化）；
4. 吸除染液，用緩沖液洗滌2次。
關鍵提示：殘留去污劑可能導致假陽性染色，需清洗玻片或培養器皿。
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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。
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