熒光染料AF532標記的刀豆蛋白A

【??參數信息】

英文名稱：AF 532 ConA ；Alexa Fluor 532 Concanavalin A

中文名稱：AF 532刀豆蛋白A，熒光染料AF532標記的刀豆蛋白A

激發/發射波長： 495 nm/519 nm

運輸：低溫運輸

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】（熒光染料AF532標記的刀豆蛋白A）

AF 532 ConA 是 Alexa Fluor 532熒光染料與刀豆蛋白A共價結合形成的復合物 。

ConA 本質是一種植物凝集素，分子量約 104 kDa，由 4 個 26 kDa 亞基組成。

特異性結合 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基，存在于糖蛋白、糖脂等含糖結構中。

AF 532 特性：

熒光探針，具有高水溶性、細胞通透性及光穩定性，適用于活細胞實時成像與動態追蹤 。

作用機制

（一）糖結合與標記機制

糖特異性識別：

ConA 通過其糖結合域識別細胞表面的 α-甘露糖/葡萄糖殘基，此過程依賴鈣離子和鎂離子維持活性構象 。

熒光標記功能：

AF 532 與 ConA 共價結合后，保留糖結合活性，同時賦予熒光特性。

通過熒光顯微鏡或流式細胞術，可實時觀察細胞表面糖基化分布、動態變化及細胞間相互作用。

（二）生物學功能機制

免疫調節作用：

T 細胞有絲分裂原：激活 T 細胞，招募淋巴細胞，誘導細胞因子產生。

誘導程序性細胞死亡：通過線粒體介導的凋亡和自噬途徑，觸發細胞死亡。

激活轉錄因子 NFAT：調控免疫相關基因表達，影響 T 細胞受體信號。

病理模型應用：

誘導急性肝損傷：ConA 注射小鼠后，通過 T 細胞介導的免疫反應攻擊肝細胞，模擬人類自身免疫性肝炎。

機制涉及：

肝細胞損傷釋放 DAMPs。

CD8?T 細胞通過穿孔素加劇肝損傷 。

炎癥因子（TNF-α、IL-6）水平升高，導致轉氨酶（ALT/AST）釋放 。

（三）應用技術機制

糖基化示蹤：

AF 532 ConA 標記細胞表面糖蛋白，用于研究 糖基化模式、細胞信號轉導及病原體-宿主相互作用。

葡萄糖檢測系統：

基于熒光共振能量轉移：

初始狀態：ConA與糖基聚合物結合，熒光淬滅。

加入葡萄糖：葡萄糖競爭結合 ConA，使熒光恢復，實現葡萄糖定量檢測。

親和層析純化：

固定化 ConA 用于純化含 α-甘露糖/葡萄糖的糖蛋白。

【應用領域】

（一）細胞表面糖基化研究

標記活細胞表面的甘露糖/葡萄糖修飾，用于：

觀察細胞膜糖基化模式；

實時追蹤糖基化動態變化或細胞-基質相互作用。

（二）細胞固定與分離

通過 ConA 磁珠形式：

結合細胞膜糖蛋白，固定細胞或細胞核，用于 CUT&Tag、CUT&RUN 等染色質研究技術，避免離心損失；分離特定糖類型的細胞（如干細胞、免疫細胞）。

（三）熒光成像技術

共聚焦顯微鏡/超分辨顯微鏡（STORM） ：利用 AF 532 的高分辨率和光穩定性，實現亞細胞結構成像；

多色成像：與其他熒光染料（如 AF 488、AF 594）兼容，同時標記多種靶點；

活細胞動態追蹤：監測糖蛋白分布、內吞過程或細胞間相互作用。

【相關試劑】

AF 514 酸

AF647 炔烴

AF488 TCO

AF647 疊氮化物

AF514 酪胺(XFD514 tyramide)

AF488-刀豆蛋白A(ConA)探針

AF594-刀豆蛋白A(ConA)探針

AF 555胺與Alexa Fluor 555胺的分子相同

AF 568胺與Alexa Fluor 568胺的分子相同

AF 647胺與Alexa Fluor 647胺的分子相同

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。