【??參數信息】
英文名稱:Ar Qual Electrocompetent Cell 農桿菌電轉感受態細胞
中文名稱:Ar Qual農桿菌電轉感受態細胞
規格:10×50μl,50×50μl
運輸:干冰運輸。
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】
Ar Qual農桿菌電轉感受態細胞是一種通過電穿孔技術實現基因轉化的發根農桿菌感受態細胞。其核心特征包括:
菌株特性:
基因型為 Agrobacterium rhizogenes Ar Qual Ri(agropine type),攜帶天然農桿堿型Ri質粒。
抗性標記:對strR和CamR具有抗性,對carb、rif敏感,對kan部分敏感
設計:
經特殊工藝制備,適用于大質粒的轉化(如基因組文庫構建)。
包裝含電轉感受態細胞(10×50μl或50×50μl)及對照質粒pCAMBIA2301。
宿主范圍:具有廣泛的植物宿主適應性,可用于雙子葉和單子葉植物的遺傳轉化。
【常規操作方法】
(1)0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分。
正置5分鐘,使乙醇充分揮發,待乙醇揮發干凈立即插入冰中,壓實冰面。
電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。
(2)取-80℃保存的農桿菌感受態插入冰中5分鐘,待其融化。
加入0.01-1 μg質粒DNA,用手bo打管底混勻,立即插入冰中。
用200 μl槍頭將感受態-質粒混合物快速移到電擊杯中,蓋上杯蓋,空管保留待用。
(3)啟動電轉儀,設置參數:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V,將電擊杯從冰中拿出。
吸水紙吸干外表面水份,快速放入電轉槽中。
啟動電擊,電擊完成快速插入冰中,加入1 ml無抗生素的TY,并轉移到感受態空管中,28℃振蕩培養2~3小時。
(4)6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的TY平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天。
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。












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