【??參數信息】
英文名稱：MSU440 Electrocompetent Cell 農桿菌電轉感受態細胞
中文名稱：MSU440農桿菌電轉感受態細胞
形態：經特殊工藝制備成電轉感受態細胞，適用于大質粒的轉化。
規格：通常為 50μl/支，包裝形式包括10×50μl或50×50μl。
運輸：低溫運輸。
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
生產廠商：西安強化生物科技
【簡單概述】
MSU440農桿菌電轉感受態細胞是一種應用于農桿菌電轉化的感受態細胞，屬于發根農桿菌菌株。
其核心特征包括：
菌株特性：
革蘭氏陰性土壤細菌，具有廣泛的宿主范圍（可感染大多數雙子葉植物、部分單子葉植物及裸子植物，如玉米、茶樹、煙草等）。
天然攜帶 農桿堿型Ri質粒（agropine-type Ri plasmid），賦予其Str。
基因型明確為 Agrobacterium rhizogenes (Str) MSU440 Ri 。
【使用方法】
（1）將0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈吸水紙上5min，待其瀝干水分，正置5min，使乙醇充分揮發干凈，立即插入冰中，壓實冰面，電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋，冰中靜置5min使其充分降溫。
（2）取-80℃保存的農桿菌感受態細胞插入冰中5min，待其融化。
（3）往50μl感受態細胞懸液中加入0.01~1μg（體積不大于6μl）質粒DNA，用手打管底使其混勻，立即插入冰中。用槍輕輕吹打混勻感受態細胞-質粒之后快速轉移到電擊杯中，蓋上杯蓋，空管保留待用。
（4）啟動電轉儀，設置參數：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V，將電擊杯從冰中取出，吸水紙吸干外表面水分，快速放入電轉槽中，啟動電擊，電擊完成快速插入冰中。
（5）加入1ml無抗生素的TY并轉移到感受態空管中，于28℃振蕩培養2~3h。
（6）6,000rpm離心1min，留取100ul左右上清，之后用槍輕輕吹打重懸菌體。之后加到含相應抗生素的TY平板上，用無菌玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，28℃培養2-3天。
【注意事項】
（1）感受態細胞應保存在-80℃，不可反復凍融和放置時間過長，以免降低感受態細胞的轉化效率。
（2）整個轉化操作，嚴格根據相應溫度及無菌條件要求進行。
（3）加入質粒的體積不應大于感受態體積的1/10。質粒不純或存在乙醇等有機物污染，會導致轉化效率急劇下降。質粒增大一倍，轉化效率下降一個數量級。
（4）為確保轉化效率，整個操作過程應盡量輕柔，并保持低溫。
（5）電轉感受態細胞中不可混入氣泡，轉化高濃度的質粒可相應減少最終涂板用量。
（6）平板上克隆密度過大時，由于營養不足，克隆生長變慢，菌落變小。為獲得大菌落，應減少質粒用量。
（7）MSU440具抗性，不可用于具抗性質粒的轉化。
（8）為了保證轉化效率，發根農桿菌的培養務必使用TY培養基。
（9）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。
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