【??參數(shù)信息】
英文名稱：Hydroxystilbamidine (FluoroGold)
中文名稱：羥芪巴脒（熒光金）
CAS NO：223769-64-0
分子式：C18H24N4O7S2
分子量：472.54
Emission (Em)：625
Excitation (Ex)：360
外觀：黃色粉末
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
羥芪巴脒（熒光金）是一種能夠結(jié)合 DNA 和 RNA 的染料，是一種熒光陽離子染料，常用作逆行神經(jīng)元示蹤劑，也被發(fā)現(xiàn)是細(xì)胞核糖核酸酶的強(qiáng)效抑制劑。
【操作流程（組織學(xué)染色）】
（一）染料濃度
1-10%的羥芪巴脒都得以成功應(yīng)用。先實(shí)驗(yàn)建議使用4%濃度。如果在注射位點(diǎn)發(fā)生不理想的壞死或標(biāo)記太強(qiáng)烈，將濃度降低到2%。
（二）染料注射
①壓力注射：這可能是使用頻繁的用法。注射體系范圍從0.05-1µl，典型為0.1-0.2µl。
②晶體：示蹤劑的晶體可從微量移液槍的槍尖注射。
（三）固定
雖然任何固定或不做固定都可，但含4%多聚甲醛的PBS是常使用的。含高濃度重金屬的固定劑會淬滅熒光，而高濃度的戊二醛（＞1%）也許增加背景熒光。
（四）組織化學(xué)處理
含羥芪巴脒的組織可能依照任何通用的組織學(xué)技術(shù)來作處理。固定組織的冰凍切片常使用。
（五）聯(lián)用技術(shù)
此處切片可能需進(jìn)一步處理來做標(biāo)記比如放射性自顯影、HRP組織化學(xué)術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)、第二種熒光示蹤劑、熒光復(fù)染等等。
（六）裱貼、透化和蓋片
切片通常裱貼在明膠包被的載玻片、空氣干燥、浸在二甲苯內(nèi)，之后用非熒光的DPX封片劑來封片和蓋片。
切片可能用分級純來脫水，除非這一步與第二種染料不兼容。
如果羥芪巴脒與熒光免疫細(xì)胞化學(xué)組合，之后切片需空氣干燥，并且直接用DPX蓋片。
（七）觀察和成像
羥芪巴脒可以用熒光顯微鏡來觀察。當(dāng)用中性pH緩沖液處理組織，發(fā)射光呈金色；而當(dāng)用酸性pH緩沖液（比如pH 3.3）處理組織時，發(fā)射光呈藍(lán)色。
可以用數(shù)碼機(jī)或膠片機(jī)拍攝。絕大多數(shù)曝光時間范圍從10~60s曝光，具體取決于物鏡放大倍數(shù)和標(biāo)記強(qiáng)度。30s曝光大概是平均的。
多重曝光可能采用來同時觀察羥芪巴脒和另一個示蹤劑。因此，UV將與明場照明組合以同時定位羥芪巴脒和HRP或放射自顯影的銀粒。
類似地，藍(lán)光激發(fā)也可能聯(lián)合使用同時觀察FITC的綠色發(fā)光，而綠色激發(fā)光也可能用于同時觀察碘化丙啶或溴化乙錠的紅色發(fā)光。
【相關(guān)試劑】
Zeatin玉米素
CDCFDA，SE
Inosine 5-diphosphate
ReadiLink mFluor 700
(±)-Jasmonic acid茉莉酸
YPDA Agar Medium YPDA瓊脂培養(yǎng)基
YPDA Medium YPDA液體培養(yǎng)基
Minimal SD Agar Base SD瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基
Minimal SD Base SD基礎(chǔ)培養(yǎng)基
Stigmasterol Glucoside 豆甾醇葡萄糖苷
pCAMBIA1300 Plant Expression Vector
pCAMBIA1301 Plant Expression Vector
pCAMBIA1305.1 Plant Expression Vector
(±)-Jasmonic Acid-Isoleucine茉莉酸-異亮an酸
12-oxo Phytodienoic Acid (OPDA)12-氧代植物二烯酸
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