大腸桿菌TOP 10F化學感受態細胞

【??參數信息】

英文名稱：TOP 10F` Chemically Competent Cell

中文名稱：大腸桿菌TOP 10F化學感受態細胞

菌株名稱：TOP 10F’

產品種屬：大腸桿菌

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

菌株描述

TOP 10F`菌株來源于TOP 10菌株，除了F′附加體（F′ episome）的引入。

F′附加體攜帶四環素抗性基因，使其能從攜帶f1復制子的載體中純化單鏈DNA。

F′附加體還攜帶lacIq抑制子，參與IPTG作為誘導劑對trc，tac和lac啟動子的誘導表達。

TOP 10F`菌株進行藍白斑篩選，需要IPTG誘導β-半乳糖苷酶基因的表達。

recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。

適用于克隆和質粒擴繁。

大腸桿菌TOP 10F化學感受態細胞，TOP 10F` 是基于大腸桿菌 TOP 10 菌株經特殊工藝處理得到的化學感受態細胞，其基因型包含 F' 附加體（F' episome）及關鍵突變（如 lacIq、recA1、endA1 等）。

具有以下特性：

抗性基因：攜帶四環素抗性（TetR）和鏈霉su抗性（StrR），適用于篩選含相應抗生素的質粒。

F' 附加體：引入 F' {lacIq Tn10 (TetR)} 因子，可抑制 trc、tac、lac 啟動子的表達，適用于毒性蛋白的擴繁。

突變特征：

recA1：抑制同源重組，減少插入 DNA 的非特異性重組，提高克隆穩定性。

endA1：缺失內切酶 I 活性，減少質粒降解，提升提取 DNA 的純度。

mcrA：允許克隆甲基化 DNA（如真核生物基因組），擴展應用范圍。

轉化效率：經 pUC19 載體檢測，轉化效率可達 >10? 至 10? cfu/μg DNA，高于常規感受態細胞。

【應用場景】

（1）常規基因克隆

用于DNA片段的克隆，適用于低豐度目的基因的擴增。

（2）質粒擴增與純化

高拷貝數質粒的快速擴增，結合endA1突變實現高純度質粒DNA提取。

（3）藍白斑篩選

與pUC系列載體兼容，用于快速篩選陽性克隆。

（4）特殊分子生物學實驗

抗體庫構建：用于scFv抗體文庫的篩選和富集。

基因編輯工具開發：構建CRISPR-Cas9等基因編輯載體。

病毒研究：生成寨卡病毒cDNA克隆，用于病毒研究。

【相關試劑】

Kanamycin Sulfate

Ampicillin，Sodium Salt

Chloramphenicol, USP Grade

Carbenicillin，Disodium Salt

Rifampicin，USP Grade

IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

DH5a Chemically Competent Cell

JM109 Chemically Competent Cell

DH10B Chemically Competent Cell

JM110 Chemically Competent Cell

XL10-Gold Chemically Competent Cell

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。