免疫組化玻片免疫組化玻片

防脫片又叫防脫載玻片、離子修飾玻片和細(xì)胞捕獲玻片等，是用化學(xué)或物理方法進(jìn)行載玻片或蓋玻片的表面修飾，常用于細(xì)胞培養(yǎng)、病理學(xué)組織和細(xì)胞制片、液基細(xì)胞學(xué)薄層制片，以防止操作過程中細(xì)胞或組織掉片現(xiàn)象的發(fā)生。

產(chǎn)品規(guī)格：76x26mm，1~1.2mm，50片/盒

防脫片分類

防脫片可分為:普通防脫載玻片、離子修飾玻片、正電荷玻片、負(fù)電荷玻片、醛化玻片、硅化玻片、氨基化玻片和細(xì)胞捕獲玻片等。而玻片載體可以用載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等。

防脫片成分

防脫片的成分為載玻片(蓋玻片)、玻片修飾劑(黏附劑)，常用的黏附劑有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷)、多聚-L-賴氨酸(Poly-L-Lysine)、明膠、蛋清等。細(xì)胞學(xué)常用黏附劑為APES和多聚-L-賴氨酸 ，組織學(xué)常用明膠、蛋清等。

防脫片的應(yīng)用

防脫片用于細(xì)胞培養(yǎng)、病理學(xué)組織和細(xì)胞制片、液基細(xì)胞學(xué)薄層制片，尤其是在液基細(xì)胞學(xué)薄層制片中防脫片的質(zhì)量至關(guān)重要，而多聚左旋賴氨酸為目前免疫組織化學(xué)染色中zui常用的防脫片劑，適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如效果不佳，可用雙重處理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上兩種方法均無效的情況下，可用如下方法:切片在脫蠟前放在APES l:50丙酮溶液中浸泡3分鐘，晾干后即可進(jìn)行下一步驟。

目前在細(xì)胞培養(yǎng)、病理學(xué)組織和細(xì)胞制片、液基細(xì)胞學(xué)薄層制片的應(yīng)用中，細(xì)胞捕獲玻片使用zui廣，附著力強(qiáng)、粘附的細(xì)胞多。

防脫片常用制備方法

一、載玻片和蓋玻片的處理

將載玻片或培養(yǎng)用的小蓋片浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清潔液中24小時(shí)，然后流水充分沖洗，再用蒸餾水沖洗3遍以上，而后置95%乙醇中12小時(shí)。取出擦干或烤干，貯放于玻片盒內(nèi)備用。蓋玻片很薄，以上處理程序必須縮短時(shí)間，清潔液浸泡只需2小時(shí)，流水沖洗注意勿損傷玻片。

二、常用黏附劑的使用

1.多聚左旋賴氨酸(poly-1-lysine)

首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋賴氨酸濃縮液，室溫下(18~26℃)可保存1年。使用時(shí)，將試劑10倍稀釋成工作液，濃度為0.01%(ω/υ)，2-8℃冰箱保存，有效期3個(gè)月。使用方法是將充分洗凈和預(yù)先干燥的玻片浸泡于稀釋后的多聚左旋賴氨酸溶液數(shù)十秒或提拉十次，瀝干.于室溫下晾干12-24小時(shí)或在45℃以下烤箱內(nèi)烘干。處理后的玻片避光干燥可保存三個(gè)月。

2.APES(3-氨丙基-乙氧基甲硅烷)

APES必須現(xiàn)用現(xiàn)配。用此方法黏合的玻片應(yīng)垂直烤片而不能水平烤片，否則，組織片中易出現(xiàn)氣泡。 APES的使用方法:用丙酮50倍稀釋(APESl份、丙酮49份混合)，將洗凈的玻片放人稀釋好的APES中，停留20~30秒，取出稍停，再人純丙酮或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES。置通風(fēng)櫥中晾干即可。注意用APES防脫片處理的載玻片撈片時(shí)組織應(yīng)一步到位.并盡量減少氣泡存在，以免影響染色結(jié)果。注意不要將APES與其他防脫片劑混合使用。